凝膠過濾色譜(Gel filtration chromatography,GFC)是一種液相色譜技術,基于固定相的孔徑大小和分子大小對樣品進行分離。
在凝膠過濾色譜中,固定相是一種多孔凝膠,它可以通過分子大小的差異來分離不同的化合物。凝膠過濾色譜的原理是,當含有混合物的流動相流經(jīng)固定相時,樣品分子會被固定相吸附或排斥,從而在固定相中滯留或快速通過。樣品分子的大小和形狀決定了它們在固定相中的滯留時間,從而實現(xiàn)分離。
凝膠過濾色譜適用于分離分子大小差異較大的樣品,如蛋白質(zhì)、多肽、DNA 等生物大分子。它具有操作簡便、分離效率高、樣品回收率高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點,是一種常用的液相色譜技術。
在凝膠過濾色譜中,常用的固定相有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。流動相通常是水或緩沖液。樣品可以通過注射器或進樣閥注入色譜柱中,然后用紫外吸收檢測器或示差折光檢測器等檢測器進行檢測。
凝膠過濾色譜的分離效果與凝膠的孔徑大小、交聯(lián)度、流動相的流速、pH 值等因素有關。通過優(yōu)化這些條件,可以實現(xiàn)不同樣品的分離和純化。
發(fā)布于: 2023-09-18